簡單溫和的HPLC系統清洗方法

上次說到Reverse Phase 的HPLC column的簡單清洗方法。

今天來簡單說一下HPLC的系統管路要怎麼洗。這篇文章是針對有自動混合溶劑和自動進樣的儀器寫的，最簡單、較溫和（沒有強酸強鹼）的清洗方法¹

簡單的HPLC系統清洗方法

步驟1 移除column

先把column洗乾淨之後，移除column。

有關column的清洗方法可以參考下面文章:

步驟2 配置清洗溶劑

以下四種溶劑以1:1:1:1配製。

• UPW 超純水
• acetonitrile 乙腈
• isopropanol 異丙醇
• methenol 甲醇

如果配成1L，那就是UPW 250ml + 乙腈 250ml + 異丙醇 250ml +甲醇 250ml。

然後再加入甲酸(MS)或是磷酸(UV)也可。(佔總濃度0.1%)。

另外準備幾3-5個sample vial裝上述溶液。

步驟3

將所有移動相的channel的管子移到步驟2的溶液裡

步驟4

若有容易受污染的偵測器（參考說明書）請解開管路，以免受污染。

步驟5 設定清洗方法

流速0.5ml/min,一針10分鐘。

將各channel的比例平均分配。例如有4個channel，就設定混合比例

A%=B%=C%=D%=25%

步驟6 設定清洗序列

設定sample table, 注入量設定成sample loop的最大量。

樣品是步驟2準備的裝有清洗溶劑的sample vail.

然後設定步驟5的方法打30針（注意sample vial裡面裝的溶劑夠不夠用）。

所以這樣總共要洗300分鐘。

步驟7 清洗完成後

將所有channel的溶劑換成水，洗過系統之後再換成實驗要用的流洗液。

這樣就大功告成啦！

備註

如果是手動系統

那就用步驟2混合好的溶液洗300分鐘就好了，記得sample loop的進樣和bypass都要洗到。

如果系統長時間不用

如果系統有一陣子不會使用，建議把系統裡的溶劑換成異丙醇或甲醇等醇類，不要留水溶液，這樣時間久了系統可能會發霉²。

以上就是簡單的HPLC系統的清洗方法，希望可以幫到需要的人。

延伸閱讀

參考資料

1. Waters: LC 流路洗浄方法 – WKB85249 ↩︎
2. SHIMAZU: HPLCシステムの洗浄方法 ↩︎

拍玩郎阿凱

化學系畢業，目前在化學產業工作。開始上班後不久開始學日文，學了好幾年終於JLPT N1合格。最喜歡的休閒是打羽球，球打得普普球拍卻買了不少。跟大家一樣很喜歡去日本玩，旅行中喜歡拿著相機到處亂拍，買一些精緻可愛但沒什麼用的小廢物。開始寫網誌是無名小站時代的事，最近異想天開的妄想這個部落格以後可以養活自己。